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微生物的呼吸作用主要分為有氧呼吸和無氧呼吸，氧化酶試驗(yàn)、過氧化氫酶試驗(yàn)與硝酸鹽還原試驗(yàn)為有氧呼吸或無氧呼吸的重要環(huán)節(jié)，在細(xì)菌鑒定中起著重要作用。

硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個(gè)過程：一是在合成過程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉(zhuǎn)化氨基酸和細(xì)胞內(nèi)其他含氮化合物；二是在分解代謝過程中，硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體，能使硝酸鹽還原的細(xì)菌從硝酸鹽中獲得氧而形成亞硝酸鹽和其他還原性產(chǎn)物。硝酸鹽還原過程可因細(xì)菌不同而異。有的細(xì)菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，如大腸埃希氏菌等；有的細(xì)菌可使其還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨；有的細(xì)菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮，如假單胞菌和沙雷菌屬等；有的細(xì)菌還可以將其還原產(chǎn)物在合成性代謝中完全利用。

Leagene硝酸鹽還原試驗(yàn)試劑(Griess試劑+鋅還原劑) 又稱作Griess試劑、亞硝酸鹽試劑等，主要由對氨基苯磺酸溶液、α-萘胺溶液和鋅還原劑組成，主要用于鑒別腸桿菌、假單胞菌等。大腸埃希氏菌等細(xì)菌僅能使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，在乙酸作用下，亞硝酸鹽與試劑中的對氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸，后者與α-萘胺結(jié)合生成紅色產(chǎn)物；假單胞菌、沙雷菌等細(xì)菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮或氧化氮，該作用被稱為脫硝化或脫氮化作用，產(chǎn)生氣泡，但無紅色出現(xiàn)。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。