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Leagene細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一種采用經(jīng)典的碘化丙啶染色(PI staining)方法進行細胞周期與細胞凋亡分析的檢測試劑盒,碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一種可以嵌合到雙鏈DNA和RNA的堿基對中并與之結(jié)合的熒光染料,無堿基特異性。碘化丙啶與雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光,并且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比；細胞內(nèi)的DNA被Propidium Iodide染色后可以用流式細胞儀對細胞進行DNA含量測定,然后根據(jù)DNA含量的分布情況,可以進行細胞周期和細胞凋亡的分析；碘化丙啶染色后假設(shè)G0/G1期細胞的熒光強度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2,正在進行DNA復(fù)制的S期細胞的熒光強度為1～2之間。凋亡細胞由于細胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化(DNA fragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA片斷在染色過程中丟失,因此凋亡細胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染,即熒光強度小于1,在流式檢測的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰,即凋亡細胞峰。

細胞凋亡時流式細胞檢測可呈現(xiàn)亞二倍體核型的特征,根據(jù)光散射的特點,PI染色可以區(qū)分細胞凋亡和細胞壞死的細胞峰型,細胞凋亡時出現(xiàn)凋亡細胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、核碎裂,產(chǎn)生凋亡小體,使細胞的前向光散射低于正常；在細胞凋亡的早期,細胞對前向角光散射的能力顯著降低,對側(cè)向光散射的能力增加或沒有變化；在細胞凋亡的晚期,前向和側(cè)向光散射的信號均降低；細胞壞死時細胞多表現(xiàn)為細胞腫脹,因此前向光散射高于正常,對側(cè)向光散射高于正常。

Leagene Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit經(jīng)常用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細胞的細胞周期與細胞凋亡檢測,亦可用于區(qū)分細胞凋亡和細胞壞死,其檢測細胞含量范圍一般為0.1～1×10⁶之間。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。