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超氧陰離子自由基檢測試劑盒(磺胺比色法)又稱超氧陰離子產(chǎn)生速率檢測試劑盒，其檢測原理是在酸性條件下，2份O2-與羥胺反應(yīng)生成1份NO2-，NO2-在對氨基苯磺酸和萘胺的作用下反應(yīng)生成粉紅色的偶氮物質(zhì)，以分光光度計(jì)測定530nm處吸光度，在一定范圍內(nèi)顏色深淺與O2-成正比，根據(jù)A530及NO2-和O2-的相關(guān)反應(yīng)中物質(zhì)的量的關(guān)系，可算出樣品中O2-的濃度，主要用于測定植物組織中的超氧陰離子自由基含量或超氧陰離子的產(chǎn)生速率及清除能力。
價(jià)格：￥15.00
規(guī)格：反應(yīng)
貨號：ST1500
品牌：LEAGENE
服務(wù)介紹：
超氧陰離子自由基檢測試劑盒(磺胺比色法)又稱超氧陰離子產(chǎn)生速率檢測試劑盒，其檢測原理是在酸性條件下，2份O2-與羥胺反應(yīng)生成1份NO2-，NO2-在對氨基苯磺酸和萘胺的作用下反應(yīng)生成粉紅色的偶氮物質(zhì)，以分光光度計(jì)測定530nm處吸光度，在一定范圍內(nèi)顏色深淺與O2-成正比，根據(jù)A530及NO2-和O2-的相關(guān)反應(yīng)中物質(zhì)的量的關(guān)系，可算出樣品中O2-的濃度，主要用于測定植物組織中的超氧陰離子自由基含量或超氧陰離子的產(chǎn)生速率及清除能力。
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
ST1500 | 超氧陰離子自由基檢測試劑盒 | 反應(yīng) | 15元 |
實(shí)驗(yàn)流程：
1、 準(zhǔn)備樣品：
①植物樣品：取正?；蚰婢诚碌男迈r植物組織，清洗干凈，擦干，切碎，迅速稱取1~1.5g，加入2ml預(yù)冷的O2- Lysis Buffer后冰浴條件下勻漿或研磨，4℃ 10000g離心10min，上清液即為超氧陰離子自由基提取液，4℃保存?zhèn)溆谩?/span>
②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可直接用于該試劑盒的測定
③高活性樣品：如果樣品中含有較高濃度的超氧陰離子自由基，可以使用O2- Lysis Buffer進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>
2、 配制系列NO2-標(biāo)準(zhǔn)溶液：以NO2-標(biāo)準(zhǔn)(1mM)按下表繼續(xù)稀釋：
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
NO2-標(biāo)準(zhǔn)(1mM) | 0.01 | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.05 | 0.06 |
蒸餾水 | 0.99 | 0.98 | 0.97 | 0.96 | 0.95 | 0.94 |
NO2-含量(μM) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 |
3、 O2-加樣：按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入
加入物(ml) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測定管 |
蒸餾水 | 1 | -- | -- |
系列NO2-標(biāo)準(zhǔn)(1~6號) | -- | 1 | -- |
待測樣品 | -- | -- | 0.25 |
O2- Lysis Buffer | -- | -- | 0.25 |
羥胺溶液 | -- | -- | 0.5 |
混勻，25℃水浴孵育20min。 | |||
氨基苯磺酸顯色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
萘胺顯色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
混勻，30℃水浴孵育30min。 | |||
4、O2-測定：以空白調(diào)零，比色杯光徑1cm，分光光度計(jì)測定標(biāo)準(zhǔn)管、測定管530nm處吸光度(即為A標(biāo)準(zhǔn)、A測定)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
全自動(dòng)生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣運(yùn)輸要求：
1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)
準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測定。
2、血清樣本(干冰運(yùn)輸)
全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜（GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清）后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。
3、血漿樣本(干冰運(yùn)輸)
可用肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。
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