羥自由基清除率檢測試劑盒(Fenton微板法)又稱羥自由基清除能力檢測試劑盒或羥自由基檢測試劑盒，其檢測原理是H2O2/Fe2+ 通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，并將Fe2+氧化為Fe3+，導(dǎo)致紅色的鄰二氮菲-Fe2+氧化為無色的鄰二氮菲-Fe3+，使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失，可通過酶標(biāo)儀測定530~540nm處吸光度的變化，據(jù)此可計算出羥自由基的含量變化，即可計算出樣品的羥自由基清除率或清除能力，主要用于植物組織、血清、血漿等樣本。
價格：￥15.00
規(guī)格：反應(yīng)
貨號：ST1015
品牌：LEAGENE
服務(wù)介紹：
羥自由基清除率檢測試劑盒(Fenton微板法)又稱羥自由基清除能力檢測試劑盒或羥自由基檢測試劑盒，其檢測原理是H2O2/Fe2+ 通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，并將Fe2+氧化為Fe3+，導(dǎo)致紅色的鄰二氮菲-Fe2+氧化為無色的鄰二氮菲-Fe3+，使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失，可通過酶標(biāo)儀測定530~540nm處吸光度的變化，據(jù)此可計算出羥自由基的含量變化，即可計算出樣品的羥自由基清除率或清除能力，主要用于植物組織、血清、血漿等樣本。
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
ST1015 | 羥自由基清除率檢測試劑盒 | 反應(yīng) | 15元 |
實驗流程：
1、準備樣品：
①植物樣品：取正常或逆境下的新鮮植物組織，清洗干凈，擦干，切碎，迅速稱取，按1~1.5g樣品：4.5ml 蒸餾水的比例勻漿或研磨，室溫靜置4h，離心取上清
②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可用于該試劑盒的測定
③高活性樣品：如果樣品中含有較高濃度的羥自由基，可用蒸餾水進行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>
2、?OH加樣：按照下表設(shè)置空白管、未損傷管、損傷管、對照管、測定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，然后，置各管于37℃水浴鍋保溫1h；如果樣品中的羥自由基(?OH)濃度過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進行測定，樣品的檢測最好能設(shè)置平行管。
加入物(單位：ml) | 空白管 | 未損傷管 | 損傷管 | 對照管 | 測定管 |
鄰二氮菲溶液 | -- | 0.15 | 0.15 | -- | 0.15 |
OH Assay Buffer | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.2 |
亞鐵顯色液 | -- | 0.1 | 0.1 | -- | 0.1 |
蒸餾水 | 0.8 | 0.55 | 0.45 | 0.7 | 0.35 |
待測樣品 | -- | -- | -- | 0.1 | 0.1 |
氧化劑 | -- | -- | 0.1 | -- | 0.1 |
?OH測定：取96孔板，將各管溶液依次吸取250ul加至96孔板中，用酶標(biāo)儀檢測530~540nm處各孔吸光度值，依次記為A0、A1、A2、A3`、A3。
實驗結(jié)果：
全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣運輸要求：
1、動植物組織樣本(干冰運輸)
準確稱取動物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進行測定。
2、血清樣本(干冰運輸)
全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜（GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清）后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。
3、血漿樣本(干冰運輸)
可用肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。
4、細胞樣本
貼壁細胞：將細胞用PBS沖洗2次后，用細胞刮將細胞小心刮下來，將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。
懸浮細胞：將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。
細胞上清：標(biāo)本于2-8℃，3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清，上清立即用于實驗，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。
僅供科研用途，不可用于臨床診斷！
